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原文:Integrated metabolomics and electronic tongue analysis reveal dynamic changes in taste characteristics and non-volatile metabolites during Xinyang Maojian green tea processing.
期刊:Food chemistry: X(影响因子 9.2) | PubMed | PMC 全文(含 PDF)
茶是全球消费量仅次于水的饮品,而绿茶作为不发酵茶,凭借其“清汤绿叶”的风味特征和健康益处,在过去几十年里产量与消费量持续增长。在中国十大名茶之中,信阳毛尖(Xinyang Maojian, XYMJ)产自河南信阳高山多云雾、低温的生长环境,以“细、圆、光、直、多白毫”的外形和鲜爽回甘的滋味著称。然而,以往对信阳毛尖的研究多集中在加工过程中“香气”如何形成,或者只关注品种、海拔、杀青等单一环节对非挥发性代谢物的影响;对于从鲜叶到成品茶整个制造链条里,那些真正决定“甜、鲜、苦、涩”等口感的核心非挥发性代谢物如何动态变化,科学界仍缺乏系统认识。
近日,一项发表于《Food Chemistry: X》(影响因子 9.2)的研究填补了这一空白。研究者联合代谢组学、多元统计分析与电子舌(E-tongue)评价,追踪了信阳毛尖在七个关键加工步骤中的滋味性状与代谢指纹,明确了塑造其口感的关键工序和靶向化合物,为优化加工工艺、定向提升感官品质提供了理论基础。
信阳毛尖的加工流程包括:鲜叶(XY)→ 杀青(SQ)→ 揉捻(RN)→ 散摊/散射(BT)→ 理条/做形(LT)→ 初烘(CH)→ 复烘(FH)。其中,杀青通过高温迅速灭活酶活性,阻止多酚酶促氧化,形成绿茶“清汤绿叶”的基础,同时散发青气、发展茶香;揉捻使叶细胞适度破损、茶汁溢出,便于冲泡时内含物浸出;理条塑造紧细圆直的外形;初烘与复烘则逐步将含水量降至约 5–6%,固定外形并进一步提升香气与滋味。
尽管已有研究表明杀青对香气轮廓贡献最大、揉捻促进香气活性成分释放,但“关键呈味物质在整个制造过程中的动态变化及其对口感质量的直接作用”仍不清晰。由于信阳毛尖以“独特甜味”备受推崇,解析其甜味及相关非挥发性代谢物的变化规律,成为提升品质的关键。
研究团队从河南信阳光山县标准示范茶园采集单芽鲜叶,并按实际生产流程取得七个阶段的样品。借助电子舌系统(TS-5000Z)对七个阶段茶汤的酸、涩、苦、咸、鲜、甜、丰富度及苦/涩回味进行量化,同时以感官审评(GB/T 23776-2018)描述外形、汤色、香气、滋味与叶底。
电子舌雷达图显示:随着加工推进,甜味逐渐增强,而苦味回味与涩味回味下降;其中“散射”和“初烘”是提升甜味的关键步骤,而“初烘”被确认为降低苦味回味和涩味回味的核心工序。干燥过程还有效增强了鲜味与甜味。风味轮分析进一步表明,复烘后的成品茶综合感官表现最佳:条索匀整嫩绿、汤色嫩黄明亮、呈现鲜甜带蜜香,滋味醇和滑顺、回甘持久。

在代谢层面,研究基于自建的茶叶质谱数据库(Tea-MSDB,含 3000 余种标准品与文献报道代谢物),采用 UPLC-QTOF-MS/MS 非靶向代谢组学,共检测到 1335 个代谢物离子特征,并鉴定出 90 个非挥发性代谢物,包括 27 个黄酮类、14 个氨基酸、13 个儿茶素及其衍生物、7 个有机酸、6 个脂质、5 个生物碱、4 个核苷酸、3 个维生素与辅因子等。
通过 OPLS-DA 多元统计分析(R2X=0.767、R2Y=0.609,置换检验 Q2 截距为 −0.431,模型未严重过拟合),七个阶段样品被划分为三簇:鲜叶单独成组 I;杀青、揉捻、散射、做形聚为组 II,代谢组成相似;初烘与复烘聚为组 III。火山图与 Venn 分析进一步筛选出组间差异成分。

最终,研究者锁定 36 个关键差异代谢物,并确认“杀青”和“初烘”是塑造滋味的两个决定性工序。热图展示了这 36 个代谢物在加工链中的相对丰度变化(红为高、绿为低)。

具体呈味机制上:儿茶素、黄酮类、氨基酸与碳水化合物的动态波动共同构建了感官品质。甜味的改善源于可溶性二糖(主要是蔗糖)的积累;鲜味的增强与谷氨酸(glutamic acid)的富集密切相关;而苦味与涩味回味的减轻则与可可碱(theobromine)水平下降相关。此外,针对 32 种糖及其衍生物的目标代谢组学(GC–MS)显示,总可溶性糖、单糖、二糖等在加工中发生显著动态变化,其中蔗糖等二糖的积累直接支撑了信阳毛尖“回甘”的特征。

研究还绘制了代表性黄酮及其糖苷、氨基酸与糖类的生物合成代谢路径图,显示这些通路在加工过程中的相对丰度演变,从代谢网络层面解释了滋味形成的物质基础。

本研究的创新在于方法整合。首先,常规非靶向代谢组学在茶叶研究中常面临覆盖不全、鉴定不准的问题;团队使用自建 Tea-MSDB 数据库,匹配精确质量(±0.03 Da)、保留时间(±0.05 min)与碎片离子(±0.10 Da),显著提升注释可靠性。其次,引入电子舌将“人的口感”转化为可量化的传感器信号,并与代谢物做 Spearman 相关分析,架起化学成分与感官属性之间的桥梁。第三,针对信阳毛尖的甜味特质,专门用 GC–MS 对 32 种糖及衍生物进行外标定量,弥补了非靶向方法对糖类覆盖不足的短板。
样品前处理上,非挥发性代谢物以 70% 甲醇超声提取三次,UPLC 采用 BEH C18 柱与甲酸水/乙腈梯度洗脱,QTOF-MS 在正离子模式下以 DIA 采集;糖类则经冻干粉碎、甲醇提取后由 DB-5MS 毛细管柱分离、选择离子监测模式定量,保证灵敏度。
该研究不仅阐明信阳毛尖加工中“哪些步骤最重要、哪些化合物最关键”,也为其他绿茶的品质优化提供了范式。对科研而言,它展示了“代谢组学 + 电子舌 + 靶向验证”的组合策略在食品风味研究中的威力;对产业而言,生产者可依据结果精准调控杀青与初烘参数,促进蔗糖、谷氨酸积累并降低可可碱,从而定向增强甜鲜、抑制苦涩,稳定并提升名优绿茶的感官品质。未来,这一框架还可拓展至不同品种、海拔与季节的茶叶加工研究,推动中国名茶从“看天做茶、凭经验制茶”走向“数据驱动、精准加工”。
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